PHEM-Puffer-Rezeptur
PHEM-Puffer wurde hauptsächlich für Gewebe und Zellkulturen verwendet, die für immunzytochemische Untersuchungen aufbereitet werden. Die meisten Antigene, insbesondere die intrazellulären, färben sich mit PHEM besser als mit PBS, und es hat auch eine geringere Wirkung auf biochemische Reaktionen und Enzyme. Die sehr gute Erhaltung der zellulären Ultrastruktur, insbesondere der Mikrotubuli, ist ebenfalls ein Vorteil der Verwendung von PHEM.
Referenzen:
- Schliwa, Manfred, and Jonathan Van Blerkom. „Structural interaction of cytoskeletal components.“ The Journal of Cell Biology 90.1 (1981): 222-235.
- Jacqueline Montanaro: Verbesserte Ultrastruktur von wirbellosen Meerestieren unter Verwendung von nicht-toxischen Puffern
Zubereitungsrezept für 500 ml Puffer PHEM 0,2 M
Lösen Sie das Reagenzienpulver in 400 ml destilliertem Wasser in folgender Reihenfolge auf:
Reagenzienpulver | Nummer C.A.S | Gewicht Gramm | Ref. em-grade |
HEPES | 7365-45-9 | 0.598 gr. | GP19 |
EGTA | 67-42-5 | 0.380 gr. | GP27 |
MgSO4 , 7H2O | 10034-99-8 | 0.098 gr | GP28 |
P.I.P.E.S. | 5625-37-6 | 1.814 gr | GP21 |
WASSER D. | Auf 500 ml Endvolumen auffüllen und mit NaOH auf den gewünschten pH-Wert einstellen |
Filtern Sie die Lösung auf 0,22µ.