Préparation et utilisation de l’OTE . (vidéo)
protocole
La préparation de la solution OTE est similaire à l’infusion d’eau de thé à 70°C pas plus.
– A l’aide d’un agitateur magnétique chauffant réglé à 70°C, dissolvez votre poudre d’OTE à une concentration de 0,2% maximum (car la saturation est atteinte à 0,3%)
– Après dissolution complète (atteinte en 15 à 30 minutes sous agitation à 70°C),
- Filtrez votre solution d’extrait OTE à 0,45µ ou mieux à 0,22µ
- A conserver dans un petit tube Eppendorf rempli au maximum pour réduire l’air contenant de l’oxygène ou dans un flacon AirLess .
- Conserver à l’obscurité à 4 °C (lors de la manipulation, laissez toujours vos solutions revenir à TA)
- Contrastez vos grilles avec OTE pendant 15 à 20 minutes, obscurité, RT
- Egoutter simplement ne pas rincer ou laver très brièvement 1 à 2 secondes, après séchage
- Post-coloration 1 à 2 minutes avec du citrate de plomb selon Reynolds (Ref #11300)
- Égoutter, rincer brièvement, sécher et prêt à observer.
