Le tampon PHEM est principalement utilis\u00e9 pour les tissus et les cultures cellulaires trait\u00e9s pour des \u00e9tudes d’immunocoloration immunocytochimique.<\/p>\n
La plupart des antig\u00e8nes, en particulier les antig\u00e8nes intracellulaires, se colorent plus efficacement avec le tampon PHEM qu’avec le tampon PBS. Il a \u00e9galement un effet plus limit\u00e9 sur les r\u00e9actions biochimiques et les enzymes.<\/p>\n
Un avantage significatif de l’utilisation du PHEM est son excellente pr\u00e9servation de l’ultrastructure cellulaire, en particulier des microtubules.<\/p>\n
R\u00e9f\u00e9rences : Schliwa, Manfred, et Jonathan Van Blerkom. \u00ab\u00a0Interaction structurelle des composants du cytosquelette\u00a0\u00bb. The Journal of Cell Biology 90.1 (1981): 222-235. Jacqueline Montanaro : Am\u00e9lioration de l’ultrastructure des invert\u00e9br\u00e9s marins \u00e0 l’aide de tampons non toxiques.<\/p>\n
Stockage : 4\u00b0C – 8\u00b0C<\/p>\n
Immunofluorescence : Conseils d’experts sur l’immunomarquage en culture cellulaire<\/em><\/p>\n par Nancy Kedersha<\/p>\n Les chercheurs qui se lancent dans l’immunomarquage sont confront\u00e9s \u00e0 une s\u00e9rie de d\u00e9fis techniques qui peuvent faire la diff\u00e9rence entre l’obtention d’images claires et informatives, un d\u00e9sordre confus ou pas de signal du tout\u00a0\u00bb, explique Nancy Kedersha, ma\u00eetre de conf\u00e9rences en m\u00e9decine \u00e0 la Harvard Med School et directrice de la microscopie confocale au Brigham and Women’s Hospital. \u00ab\u00a0Pire encore, le r\u00e9sultat pourrait \u00eatre quelque chose qui semble tr\u00e8s sp\u00e9cifique mais qui est trompeur ou tout simplement faux\u00a0\u00bb.<\/p>\n Dans ce billet, Nancy partage ses conseils d’expert sur l’immunomarquage et souligne les points cl\u00e9s \u00e0 prendre en compte lors de la planification de vos exp\u00e9riences d’imagerie utilisant des cellules cultiv\u00e9es.<\/p>\n Les anticorps sont optimis\u00e9s par le syst\u00e8me immunitaire pour fonctionner dans l’environnement riche en sodium du sang – c’est pourquoi la solution saline tamponn\u00e9e au phosphate (PBS) est g\u00e9n\u00e9ralement le tampon de choix pour la coloration des cellules de surface. Cependant, le milieu intracellulaire est domin\u00e9 par le potassium et il faut s’efforcer de recr\u00e9er ces conditions.<\/p>\n Le syst\u00e8me de tampon utilis\u00e9 pendant les incubations et les lavages apr\u00e8s la fixation (voir ci-dessous) et la perm\u00e9abilisation peut faire une \u00e9norme diff\u00e9rence dans l’intensit\u00e9 du signal. Des tampons tels que PHEM ou CSK ont \u00e9t\u00e9 mis au point pour les cellules perm\u00e9abilis\u00e9es et non fix\u00e9es dans le cadre d’essais bas\u00e9s sur la fonction. Ces tampons peuvent \u00eatre utilis\u00e9s sur des cellules fix\u00e9es et perm\u00e9abilis\u00e9es \u00e0 la place du PBS et sont particuli\u00e8rement utiles pour les antig\u00e8nes cytosquelettiques ou cytoplasmiques.<\/p>\n En termes d’intensit\u00e9 du signal (d’apr\u00e8s ma propre exp\u00e9rience), environ 10 % des antig\u00e8nes cellulaires se colorent nettement mieux dans le tampon PHEM que dans le PBS, 50 % se colorent mod\u00e9r\u00e9ment mieux dans le tampon PHEM et 30 % ne pr\u00e9sentent aucune diff\u00e9rence. Les 10 % restants se colorent beaucoup mieux dans le PBS ! C’est pourquoi j’essaie r\u00e9guli\u00e8rement le PHEM et le PBS lorsque j’utilise un anticorps pour la premi\u00e8re fois. Il existe \u00e9galement une s\u00e9lection d’autres tampons que vous pouvez exp\u00e9rimenter (voir ci-dessous).<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" Ready to use or diluteTrouvez le bon environnement de travail… (AKA, optimisez vos tampons.)<\/h3>\n
\nEau distill\u00e9e
\nMicrofiltr\u00e9e – St\u00e9rile
\nScell\u00e9 sous gaz neutre
\nEM grade<\/p>\n","protected":false},"featured_media":3663,"template":"","meta":{"_acf_changed":false,"_seopress_titles_title":"","_seopress_titles_desc":"","_seopress_robots_index":"","_seopress_robots_follow":"","_seopress_robots_imageindex":"","_seopress_robots_snippet":"","_seopress_robots_primary_cat":"","_seopress_robots_breadcrumbs":"","_seopress_robots_freeze_modified_date":"","_seopress_robots_custom_modified_date":"","_seopress_robots_canonical":"","_seopress_social_fb_title":"","_seopress_social_fb_desc":"","_seopress_social_fb_img":"","_seopress_social_fb_img_attachment_id":0,"_seopress_social_fb_img_width":0,"_seopress_social_fb_img_height":0,"_seopress_social_twitter_title":"","_seopress_social_twitter_desc":"","_seopress_social_twitter_img":"","_seopress_social_twitter_img_attachment_id":0,"_seopress_social_twitter_img_width":0,"_seopress_social_twitter_img_height":0,"_seopress_redirections_value":"","_seopress_redirections_enabled":"","_seopress_redirections_enabled_regex":"","_seopress_redirections_logged_status":"","_seopress_redirections_param":"","_seopress_redirections_type":0,"_seopress_analysis_target_kw":"","_seopress_news_disabled":"","_seopress_video_disabled":"","_seopress_video":[],"_seopress_pro_schemas_manual":[],"_seopress_pro_rich_snippets_disable_all":"","_seopress_pro_rich_snippets_disable":[],"_seopress_pro_schemas":[],"itsec_x_frame_options":""},"product_brand":[],"product_cat":[227],"product_tag":[],"class_list":["post-4117","product","type-product","status-publish","has-post-thumbnail","product_cat-tampons","pa_buffer-concentration-01m-fr","pa_buffer-concentration-02m-fr","pa_volume-1000ml-fr","pa_volume-125ml-fr","pa_volume-250ml-fr","pa_volume-500ml-fr","first","instock","taxable","shipping-taxable","purchasable","product-type-variable"],"acf":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.em-grade.com\/fr\/wp-json\/wp\/v2\/product\/4117","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.em-grade.com\/fr\/wp-json\/wp\/v2\/product"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.em-grade.com\/fr\/wp-json\/wp\/v2\/types\/product"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.em-grade.com\/fr\/wp-json\/wp\/v2\/media\/3663"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.em-grade.com\/fr\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=4117"}],"wp:term":[{"taxonomy":"product_brand","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.em-grade.com\/fr\/wp-json\/wp\/v2\/product_brand?post=4117"},{"taxonomy":"product_cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.em-grade.com\/fr\/wp-json\/wp\/v2\/product_cat?post=4117"},{"taxonomy":"product_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.em-grade.com\/fr\/wp-json\/wp\/v2\/product_tag?post=4117"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}