Frequently asked questions

Pour une bonne pratique expérimentale en laboratoire, il est impératif de prendre en compte la température de vos réactifs. Permettez toujours à vos réactifs de revenir à température ambiante dans le laboratoire (généralement entre 18 et 22 °C) avant de commencer votre protocole expérimental. Cela garantira une meilleure reproductibilité de vos résultats, en tenant compte non seulement des concentrations, mais aussi des paramètres de température et de temps de réaction.

L’eau est essentielle à la recherche en sciences de la vie, mais pour de nombreux scientifiques, la réflexion la plus importante sur ce réactif de laboratoire le plus largement utilisé est « combien en ai-je besoin ? » Parce que l’eau est capable de servir de solvant pour de nombreuses substances et réactifs (solution aqueuse), méfiez-vous, elle peut devenir contaminée. L’eau peut également être un milieu de dilution.

Même au sein du même laboratoire, l’eau utilisée dans une expérience peut différer de celle utilisée dans une autre. Il existe une multitude de méthodes, d’appareils et de moyens de produire de l’eau purifiée, nous devrons donc spécifier les moyens de production de cette eau. Toutes les eaux ne sont pas identiques, donc considérez l’eau comme un réactif de laboratoire et examinez-la en conséquence. Comprendre l’importance de la qualité de l’eau et la surveiller de près est important pour garantir la reproductibilité expérimentale sur plusieurs jours, mois et même années.

, months and even years.

La Société américaine de chimie (ACS), avec plus de 150 000 membres, est l’une des plus grandes organisations scientifiques du monde et l’une des principales sources d’informations scientifiques fiables sur la chimie.

Elle publie des références, commande et décrit chaque produit ACS selon une méthode normalisée. Si vous avez besoin d’informations plus détaillées sur un produit chimique portant l’étiquette ACS, vous pouvez trouver sa composition exacte dans la base de données disponible gratuitement sur le site web https://www.acs.org/content/acs/en.html.

Les solutions microfiltrées sont produites par filtration sous vide sur une membrane (dispositif de filtration). Il existe de nombreux types de membranes (diamètre, porosité, matériaux, etc.).

Les membranes utilisées pour filtrer une solution aqueuse sont fabriquées à partir d’un filtre à base de cellulose (ester de cellulose), avec un diamètre adapté à votre dispositif de filtration et une porosité de 0,4 µ ou 0,2 µ (la porosité de 0,2 µ permet également de retenir les bactéries (d’où la méthode de stérilisation).

Les compartiments cellulaires fonctionnent à des niveaux de pH proches de 7. Il n’y a pas de pH universel pour la fixation.

Une solution mère est généralement une solution concentrée qui peut être diluée pour obtenir des solutions filles moins concentrées. Par exemple : préparer une solution mère de 0,2 M pour obtenir un tampon de phosphate de 0,1 M (solution fille), une solution mère de 0,4 M pour obtenir une solution fille de 0,2 M.

All products on the market generally have an expiration date. This doesn’t necessarily mean you can’t use them after that date. The expiration date is the date on which the supplier’s warranty on your product expires.

We’ve all tested this, sometimes using chemicals that have been out of date for several years, and the result was excellent (it generated less waste). It’s important to remember that product shelf-life is highly dependent on packaging and storage.

EM-grade vise à être un acteur éco-responsable dans le secteur de la microscopie électronique, en promouvant l’utilisation rationnelle de produits chimiques ayant un double impact sur notre environnement et notre santé.

Si nous ne pouvons pas nous passer de certains produits parfois toxiques, alors consommons-les mieux et moins souvent.

C’est pourquoi nous préférons vendre des produits en petits volumes et dans des emballages de petite taille, afin d’éviter de les stocker pendant des années dans des déchets de laboratoire.

Les professionnels de laboratoire ne sont pas de grands consommateurs de petits conditionnements pour deux raisons principales :

1. La crainte de manquer de produit pendant les opérations de manipulation.
2. Le coût plus élevé des produits par rapport aux achats en gros.

EM grade garantit l’expédition dans les 24 heures (pas de pannes) et propose des prix raisonnables pour toutes les quantités.

La Table périodique des éléments, également connue sous le nom de Table de Mendeleïev, la Table périodique ou simplement la Table périodique, représente tous les éléments chimiques, ordonnés par numéro atomique croissant et organisés selon leur configuration électronique, qui sous-tend leurs propriétés chimiques.

La conception de cette table est généralement attribuée au chimiste russe Dmitri Ivanovitch Mendeleïev.

Un gaz neutre (ou inert) est un gaz stable (ce qui signifie qu’il possède déjà 8 électrons de valence dans sa couche externe et n’a pas besoin de réagir pour atteindre ces 8 électrons). Ces gaz sont également connus sous le nom de gaz nobles ou gaz rares. Ils n’initient pas de réactions chimiques par eux-mêmes (l’azote est un gaz inerte, tout comme l’argon, le plus largement utilisé dans les conditions EM-grade).

Lorsque la solution tampon a une concentration élevée, à partir de 0,4 molaire et au-dessus, elle peut cristalliser dans une certaine mesure lorsqu’elle est stockée au réfrigérateur. Cette condition est réversible, car les cristaux se dissoudront en quelques heures à température ambiante. Vous pouvez la réchauffer pour accélérer la disparition des cristaux. Cette cristallisation ne change pas les propriétés chimiques de la solution tampon.

DPBS (Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline)

PBS (Phosphate Buffered Saline). En raison des contraintes d’osmolarité associées au fixateur, ou à des fins de rinçage, il est généralement préparé à 0,1 M ou 0,2 M à un pH d’environ 7 à 7,4, pour compenser l’acidité légère libérée par les cellules pendant la fixation.

DPBS (développé par Dulbecco) peut contenir des additifs de CaCl2 et de MgCl2 pour faciliter le détachement des cellules en culture. Si le DPBS ne contient pas ces additifs, il peut être remplacé par du PBS.

Les tampons à base de phosphate deviennent contaminés après quelques mois (2 à 3 mois maximum), car ils sont vitaux. Ils peuvent être décontaminés et continuer à être utilisés simplement en filtrant à 0,22 µ (filtre seringue, etc.). Stockez à 4 – 8°C.

Ce n’est pas un tampon vital, car il contient des traces d’éléments toxiques tels que l’arsenic.

Cependant, il est encore largement utilisé lors de la fixation des cellules (puisque la fixation tue la cellule). Dans ce cas, la toxicité du cacodylate n’est plus un inconvénient. Au contraire, sa toxicité devient un avantage, grâce à sa facilité de préparation. Il a une longue durée de conservation (toxique pour les micro-organismes) et ne nécessite pas de stérilisation.

L’utilité de l’osmium tétroxyde tamponné à l’imidazole comme conservateur des lipides en microscopie électronique en transmission est vivement recommandée, car l’imidazole permet la rétention et le maintien des lipides même après déshydratation alcoolique. Par exemple, le foie de rat et d’autres tissus ont été fixés par perfusion avec du glutaraldéhyde et post-fixés avec de l’osmium-imidazole, et l’apparence des gouttelettes lipidiques a été comparée à celle après fixation dans du tétroxyde d’osmium aqueux non tamponné avec de l’imidazole. Une coloration électroniquement opaque des gouttelettes lipidiques et des particules de lipoprotéines a été remarquée après post-fixation avec 1% d’osmium-imidazole à 0,1 M, pH 7,5, pendant 30 minutes. (plus de détails voir protocole).

Gérez mieux vos inventaires chimiques avec un inventaire quantifié simple pour anticiper vos achats.

Regroupez vos achats pour économiser de l’argent, mais surtout pour limiter l’impact carbone sur la planète.

Nous négocions souvent les coûts de livraison sans tenir compte de l’impact sur notre environnement.

EM-grade vous accordera une réduction sur les frais de livraison pour toutes les commandes groupées.

En 1966, Norman Good et ses collègues ont entrepris de définir les meilleurs tampons pour les systèmes biochimiques.

En 1980, Good et ses collègues ont identifié vingt tampons qui ont établi la norme pour une utilisation dans la recherche biologique et biochimique que nous utilisons maintenant en microscopie pour la fixation des tissus.

Parfois, le stockage de vos tampons vitaux (phosphate, PHEM, etc.) dont la date de péremption (garantie) est dépassée peut être contaminé par la prolifération de bactéries ou de moisissures. Cet état de contamination ne diminue en rien les propriétés de vos tampons. Il suffit de les refiltrer à 0,22 µm ou d’autoclaver votre solution tampon.

Une fois traités, vos tampons sont sûrs à utiliser.

EM-grade signifie que ce produit est qualifié pour être utilisé dans la préparation d’échantillons à examiner sous un microscope électronique.

Un produit de qualité EM doit être :

• d’une grande pureté chimique et distillé,
• scellé dans une atmosphère neutre (saturée d’un gaz neutre tel que l’argon ou l’azote) sans contact avec l’air, que ce soit l’oxygène ou le CO2 (sans air).

Pour de petits volumes, scellez dans une ampoule ou une bouteille sans air.

Pour des volumes plus importants, nous injectons de l’argon ou de l’azote, saturant le liquide en le faisant barboter dans la solution embouteillée pour remplacer l’oxygène ou le dioxyde de carbone contenu dans l’eau.

Mais lorsque vous ouvrez la bouteille, vous perdez l’atmosphère neutre. C’est pourquoi nous vendons de petits volumes pour éviter le gaspillage.

Il n’y a aucun risque de manquer de vos produits pour vos expériences, car ils sont produits le jour de votre commande et expédiés immédiatement.

Fixer les cellules signifie les conserver dans un état aussi proche que possible de leur état vivant. Des produits chimiques sont utilisés pour fixer les protéines et d’autres composants cellulaires.

La solution de fixateur est généralement un mélange de fixateur, de tampon et de divers additifs lorsque cela est spécifié dans votre protocole.

Prêt à l’emploi : c’est-à-dire la concentration des fixateurs, la molarité et le type de tampon ajustés au pH requis (selon votre protocole), en tenant compte de l’osmolarité finale de la solution, de quelques centaines de milliOsmoles pour les plantes, les invertébrés et les mammifères, à un millier de milliOsmoles pour les espèces aquatiques ou marines.

Les aldéhydes sont les fixateurs les plus couramment utilisés. Ils sont utilisés pour stabiliser les détails structurels les plus fins des cellules et des tissus avant leur examen par microscopie optique ou électronique.

Ils peuvent être appelés fixateurs primaires, tels que le ParaFormAldehyde (PFA), le Glutaraldéhyde ou leur mélange de Karnovsky.

Mélanges contenant du paraformaldéhyde (PFA) et du glutaraldéhyde

La combinaison de paraformaldéhyde et de glutaraldéhyde comme fixateur pour la microscopie électronique bénéficie de la pénétration rapide de petites molécules HCHO, qui amorcent la stabilisation de la structure du tissu. Les oligomères de glutaraldéhyde, qui pénètrent plus lentement, provoquent une réticulation rapide et complète. Ce mélange est associé au nom de Morris J. Karnovsky de Boston. Il s’agit d’un exemple de grande innovation qui n’a été publié que dans un résumé non référencé (Karnovsky, 1965).

Son mélange original contenait 4 % de glutaraldéhyde, une concentration plus élevée que celle que de nombreuses personnes souhaitaient utiliser (Hayat, 1981). Des appellations telles que « Karnovsky demi-fort » sont devenues courantes dans les années 1960 et 1970. Le fixateur primaire a permis de résoudre les observations de tissus difficiles à préserver en microscopie électronique. L’introduction du fixateur de Karnovsky a permis de résoudre les observations de tissus difficiles à préserver en microscopie électronique, et ces fixateurs sont encore couramment utilisés.

His original mixture contained 4% glutaraldehyde, which was a higher concentration than many people wanted to use (Hayat, 1981). Designations like « half-strength Karnovsky » became common parlance in the 1960s and 1970s. Primary fixative helped to resolve observations of tissues that were difficult to preserve em Electron microscopy . the introduction of Karnovsky fixative, and they are still commonly used.

Les aldéhydes sont les fixateurs les plus couramment utilisés. Ils sont utilisés pour stabiliser les détails structurels fins des cellules et des tissus avant la microscopie optique ou électronique.

Comme le glutaraldéhyde, le paraformaldéhyde est également couramment utilisé et se dépolymérise en formol lorsqu’il est chauffé, ce qui en fait également un fixateur efficace.

Pourquoi le glutaraldéhyde est-il utilisé en microscopie électronique ?

Le glutaraldéhyde est l’un des fixateurs les plus fréquemment utilisés. Il réagit rapidement avec les protéines et, en tant que dialdéhyde, stabilise les structures par réticulation avant toute possibilité d’extraction du tampon.

Pour éviter la dénaturation du glutaraldéhyde, il doit être conservé à 4°C.