Description
Description du Tampon Phosphate de Sorensen
Le tampon phosphate de Sorensen est également connu sous le nom de sels de sodium mélangés à du phosphate. L’osmolarité d’une solution 0,1 M à pH 7,2 est de 226 mosmols ; en ajoutant 0,18 M de saccharose à la solution, l’osmolarité passe à 425 mosmols. Le pH peut être spécifié lors de la commande. La durée de conservation maximale après réception est de 3 mois.
Caractéristiques
- Tous les produits utilisés sont choisis pour leur pureté.
- Stockage : 4-8°C
- Disponible dans différentes gammes de pH : 5,8 – 8
Avantages et Inconvénients
👍Avantages
- Le plus physiologique de tous les tampons courants.
- Imite certains composants des fluides extracellulaires.
- Non toxique pour les cellules.
- Le pH varie peu en fonction de la température.
- Stable pendant plusieurs semaines à 4°C.
⚠️ Inconvénients
- Le précipité est plus susceptible de se produire pendant la fixation.
- Tend à former des précipités en présence d’ions calcium.
- Précipite l’acétate d’uranyle et tend à réagir avec les sels de plomb.
- Se contamine lentement par des micro-organismes.
Préparation des Solutions
Solutions Mères
- Phosphate de sodium dibasique 0,2 M 1 litre :
- Na2HPO4 * 2H2O (MW = 178,05) 35,61 g
- ou Na2HPO4 * 7H2O (MW = 268,07) 53,65 g
- ou Na2HPO4 * 12H2O (MW = 358,14) 71,64 g
-
- ddH2O pour obtenir 1 litre
- Phosphate de sodium monobasique 0,2 M 1 litre :
- NaH2PO4 * H2O (MW = 138,01) 27,6 g
- ou NaH2PO4 * 2H2O (MW = 156,03) 31,21 g
-
- ddH2O pour obtenir 1 litre
Tampon de Travail
- 0,1 M 100 ml : Mélanger X ml de phosphate de sodium dibasique 0,2 M avec Y ml de phosphate de sodium monobasique. Diluer à 100 ml avec ddH2O ou diluer 1:1 avec le fixateur.
Tableau de pH
pH (25°C) | X ml | Y ml |
---|---|---|
7,0 | 30,5 | 19,5 |
7,2 | 36,0 | 14,0 |
7,4 | 40,5 | 9,5 |
7,6 | 43,5 | 6,5 |
7,8 | 45,75 | 4,25 |
8,0 | 47,35 | 2,65 |
Osmolarité
- L’osmolarité est ajustée en faisant varier la molarité des phosphates ou en ajoutant du saccharose, du glucose ou du chlorure de sodium.
- pH 7,2 :
- 0,10 M = 226 mOs (milliosmoles)
- 0,05 M = 118 mOs
- 0,075 M = 180 mOs
- 0,15 M = 350 mOs