Description
Description
Le tampon phosphate de Sorensen est également connu sous le nom de sels de sodium mélangés à du phosphate. L’osmolarité d’une solution 0,1 M à pH 7,2 est de 226 mosmols ; en ajoutant 0,18 M de saccharose à la solution, l’osmolarité passe à 425 mosmols. Le pH peut être spécifié lors de la commande. La durée de conservation maximale après réception est de 3 mois.
Tous les produits utilisés sont choisis pour leur pureté.
Stockage: 4-8°C
Le tampon phosphate (tampon Sorenson) est disponible dans différentes gammes de pH : 5.8 – 8
Avantages et inconvénients
Avantages :
- Le plus physiologique de tous les tampons courants. Imite certains composants des fluides extracellulaires.
- Non toxique pour les cellules.
- Le pH varie peu en fonction de la température.
- Stable pendant plusieurs semaines à 4°C.
Inconvénients:
- Le précipité est plus susceptible de se produire pendant la fixation. Tend à former des précipités en présence d’ions calcium. Précipite l’acétate d’uranyle et tend à réagir avec les sels de plomb.
- Se contamine lentement par des micro-organismes.
Solutions pour les mères :
Phosphate de sodium dibasique 0,2 M 1 litre
Na2HPO4 * 2H20 (MW = 178.05) 35.61 g
ou
Na2HPO4 * 7H20 (MW = 268.07) 53.65 g
ou
Na2HPO4 * 12H20 (MW = 358.14) 71.64 g
+ ddH20 to make 1 liter
Phosphate de sodium monobasique 0,2 M 1 litre
NaH2PO4 * H20 (MW = 138.01) 27.6 g
ou
NaH2PO4 * 2H20 (MW = 156.03) 31.21 g
+ ddH20 to make 1 liter
Tampon de travail : 0.1 M 100 ml
Mélanger X ml de phosphate de sodium dibasique 0,2 M avec Y ml de phosphate de sodium monobasique. Diluer à 100 ml avec ddH20 ou diluer 1 : 1 avec le fixateur.
pH (25° C) X ml Y ml
Solutions pour les mères :
Phosphate de sodium dibasique 0,2 M 1 litre
Na2HPO4 * 2H20 (MW = 178.05) 35.61 g
ou
Na2HPO4 * 7H20 (MW = 268.07) 53.65 g
ou
Na2HPO4 * 12H20 (MW = 358.14) 71.64 g
+ ddH20 to make 1 liter
Phosphate de sodium monobasique 0,2 M 1 litre
NaH2PO4 * H20 (MW = 138.01) 27.6 g
ou
NaH2PO4 * 2H20 (MW = 156.03) 31.21 g
+ ddH20 to make 1 liter
Tampon de travail : 0.1 M 100 ml
Mélanger X ml de phosphate de sodium dibasique 0,2 M avec Y ml de phosphate de sodium monobasique. Diluer à 100 ml avec ddH20 ou diluer 1 : 1 avec le fixateur.
pH (25 C) X ml Y ml
pH 7,0 xml30,5 Yml19,5
7,2 36,0 14,0
7,4 40,5 9,5
7,6 43,5 6,5
7,8 45,75 4,25
8,0 47,35 2,65
L’osmolarité est ajustée en faisant varier la molarité des phosphates ou en ajoutant du saccharose, du glucose ou du chlorure de sodium.
pH 7.2:
0.10 M = 226 mOs (milliosmoles)
0.05 M = 118 mOs
0.075 = 180 mOs
0.15 M = 350 mOs
L’osmolarité est ajustée en faisant varier la molarité des phosphates ou en ajoutant du saccharose, du glucose ou du chlorure de sodium.
