El tampón imidazol permite conservar los lípidos intracelulares más difíciles de preservar.
El tampón imidazol permite la retención de lípidos. asociado al osmio durante la fijación como tampón a 0,1M
he aquí un protocolo estándar
- Glutaraldehído ‘2 a 2,5% en tampón imidazol 0,1M pH7,5 – RT
- Lavado en tampón imidazol 0,2M pH7,5 (2 baños 3 min) en RT
- Osmio 1% a 2% en tampón imidazol 0,1 pH 7,5, 30 min – RT
- Último lavado igual que el punto 2- (Lavado en tampón imidazol 0.2M pH7.5 (2 baños no más, 3 mins) en RT
Sustituya sus tampones Sorensen PBS o cacodilato habituales por imidazol , cuando su estudio dé importancia a las inclusiones lipídicas.
nota importante: si se quiere preservar el contenido de las células fijadas, evitar lavar demasiado, 1 lavado es suficiente, si los lípidos simples son los más difíciles de preservar, incluso se debe evitar el lavado.
célula hepatocitaria
