O tampão imidazol permite a retenção dos lípidos intracelulares mais difíceis de preservar.
O tampão imidazol permite a retenção de lípidos. associated with osmium during fixation in 0.1M buffer
aqui está um protocolo padrão
- Glutaraldeído ‘2 a 2,5% em tampão imidazol 0,1M pH7,5 – RT
- Lavar em tampão de imidazol 0,2M pH7,5 (2 banhos 3 min) em RT
- Ósmio 1% a 2% em tampão imidazol 0,1 pH 7,5, 30 min – RT
- Última lavagem igual ao ponto 2- (Lavagem em tampão de imidazol 0,2M pH7,5 (2 banhos não mais, 3 min) em RT
Substituir os seus tampões Sorensen PBS ou cacodilato habituais por imidazol , quando o seu estudo dá importância às inclusões lipídicas.
nota importante: se quiser preservar o conteúdo das células fixadas, evite lavar demasiado, uma lavagem é suficiente; se os lípidos simples forem os mais difíceis de preservar, a lavagem deve mesmo ser evitada.
célula de hepatócitos
