Sorensen’s Phosphate Buffer

Beschreibung

Der Sorensen-Phosphatpuffer ist auch als Mischung von Natriumsalzen und Phosphat bekannt. Die Osmolarität einer 0,1 M Lösung bei pH 7,2 beträgt 226 mosmols; durch Zugabe von 0,18 M Saccharose zur Lösung erhöht sich die Osmolarität auf 425 mosmols. Der pH-Wert kann bei der Bestellung angegeben werden. Die maximale Lagerzeit nach Erhalt beträgt 3 Monate.

Eigenschaften

• Alle verwendeten Produkte werden aufgrund ihrer Reinheit ausgewählt.
• Lagerung: 4-8°C
• Verfügbar in verschiedenen pH-Bereichen: 5,8 – 8

Vorteile und Nachteile

👍 Vorteile

• Der physiologischste aller gängigen Puffer.
• Ahmt einige Komponenten der extrazellulären Flüssigkeiten nach.
• Nicht toxisch für Zellen.
• pH-Wert variiert wenig mit der Temperatur.
• Stabil für mehrere Wochen bei 4°C.

⚠️ Nachteile

• Fällung ist während der Fixierung wahrscheinlicher.
• Neigt dazu, Fällungen in Gegenwart von Calcium-Ionen zu bilden.
• Fällt Uranylacetat und neigt dazu, mit Bleisalzen zu reagieren.
• Kontaminiert langsam mit Mikroorganismen.

Herstellung von Lösungen

Stammlösungen

• 0,2 M Dibasisches Natriumphosphat 1 Liter:

• Na2HPO4 * 2H2O (MW = 178,05) 35,61 g
• oder Na2HPO4 * 7H2O (MW = 268,07) 53,65 g
• oder Na2HPO4 * 12H2O (MW = 358,14) 71,64 g
• ddH2O auf 1 Liter auffüllen

• 0,2 M Monobasisches Natriumphosphat 1 Liter:

• NaH2PO4 * H2O (MW = 138,01) 27,6 g
• oder NaH2PO4 * 2H2O (MW = 156,03) 31,21 g
• ddH2O auf 1 Liter auffüllen

Arbeits-Puffer

• 0,1 M 100 ml: X ml 0,2 M dibasisches Natriumphosphat mit Y ml 0,2 M monobasisches Natriumphosphat mischen. Auf 100 ml mit ddH2O auffüllen oder 1:1 mit Fixativ verdünnen.

pH-Tabelle

Osmolarität

• Die Osmolarität wird durch Variation der Molarität der Phosphate oder durch Zugabe von Saccharose, Glukose oder Natriumchlorid angepasst.
• pH 7,2:

• 0,10 M = 226 mOs (Milliosmolen)
• 0,05 M = 118 mOs
• 0,075 M = 180 mOs
• 0,15 M = 350 mOs