Beschreibung
Description du produit :
Le tampon PHEM est principalement utilisé pour les tissus et les cultures cellulaires en cours de traitement pour les études d’immunomarquage immunocytochimique. La plupart des antigènes, en particulier les antigènes intracellulaires, se colorent plus efficacement avec le tampon PHEM qu’avec le tampon PBS. Il a également un effet plus limité sur les réactions biochimiques et les enzymes. Un avantage significatif de l’utilisation du PHEM est son excellente préservation de l’ultrastructure cellulaire, en particulier des microtubules.
Avantages
- très bonne préservation de l’ultrastructure cellulaire
- limite l’effet sur les réactions biochimiques et les enzymes
Application:
Le tampon PHEM est principalement utilisé pour les tissus et les cultures cellulaires en cours de traitement pour les études d’immunomarquage immunocytochimique.
Les références:
- Schliwa, Manfred et Jonathan Van Blerkom. “ Interaction structurelle des composants du cytosquelette. “ The Journal of Cell Biology 90.1 (1981) : 222-235.
- Jacqueline Montanaro : Ultrastructure améliorée des invertébrés marins à l’aide de tampons non toxiques.
Conseils d’experts en immunofluorescence : „Les chercheurs qui se lancent dans l’immunocoloration sont confrontés à une série de défis techniques qui peuvent faire la différence entre l’obtention d’images claires et informatives, un gâchis déroutant ou l’absence de signal du tout“, explique Nancy Kedersha, maître de conférences en médecine à la Harvard Med School et Directeur de la microscopie confocale au Brigham and Women’s Hospital. „Le pire de tout, le résultat pourrait être quelque chose qui semble très spécifique mais qui est trompeur ou carrément faux.“
Les anticorps sont optimisés par le système immunitaire pour fonctionner dans l’environnement sanguin riche en sodium. Cependant, le milieu intracellulaire est dominé par le potassium, des efforts doivent donc être faits pour recréer ces conditions. Des tampons tels que PHEM ou CSK ont été développés pour être utilisés dans des cellules perméabilisées et non fixées dans des tests basés sur la fonction, et ils peuvent être utilisés sur des cellules fixées et perméabilisées au lieu du PBS, particulièrement utiles avec les antigènes cytosquelettiques ou cytoplasmiques.
En termes d’intensité du signal, environ 10 % des antigènes cellulaires se colorent significativement mieux dans le tampon PHEM que dans le PBS, 50 % se colorent modérément mieux dans le PHEM et 30 % ne montrent aucune différence. Par conséquent, il est conseillé d’essayer à la fois le PHEM et le PBS lors de la première utilisation d’un anticorps. Il existe également d’autres tampons disponibles pour l’expérimentation.
Conseils :
Veiller au respect de la durée de conservation spécifiée :
- Durée de conservation flacon fermé : 4 mois.
- Durée de conservation après ouverture : 2 mois.
