Preparação e utilização do O.T.E.
A preparação da solução OTE é semelhante à infusão de água de chá a 70°C ou de tampão 0,1M.(*)
– Utilizando um agitador magnético de aquecimento regulado para 70°C, dissolva o seu pó OTE numa concentração de 0,2% (porque a saturação é atingida a 0,3%)
– Após dissolução completa (15 a 30 minutos com agitação a 70 ° C),
- Filtrar a solução de extrato de OTE a 0,45µ.
- Armazenar num pequeno tubo Eppendorf cheio até ao máximo para reduzir o ar que contém oxigénio ou num frasco AirLess.
- Armazenar no escuro a 4 °C (ao manusear, deixar sempre as soluções voltarem à temperatura ambiente)
- Contrastar as suas grelhas com OTE durante 15 a 25 minutos, na obscuridade, RT
- Escorrer simplesmente sem enxaguar
- Pós-mancha de 1 a 2 minutos com citrato de chumbo de acordo com Reynolds (Ref. n.º 11300 da Delta Microscopies)
- Escorra, passe por água brevemente, seque e está pronto a ver.
*Nota: a solução pode ser conservada durante uma semana, no máximo, mas mais tempo numa solução tampão de cacodilato, frasco AirLess (sem crescimento bacteriano).
