Preparación y utilización de la O.T.E.
La preparación de la solución OTE es similar a la infusión de agua de té 70°C o Buffer 0,1M.(*)
– Con un agitador magnético calefactor a 70°C, disolver el polvo de OTE a una concentración del 0,2% (ya que la saturación se alcanza al 0,3%).
– Después de la disolución completa (15 a 30 minutos con agitación a 70 ° C),
- Filtre su solución de extracto de OTE a 0,45µ.
- Almacenar en un pequeño tubo Eppendorf lleno al máximo para reducir el aire que contiene oxígeno o en una botella AirLess.
- Conservar en la oscuridad a 4 °C (cuando se manipulen, dejar siempre que las soluciones vuelvan a RT)
- Contraste sus rejillas con OTE durante 15 a 25 minutos, oscuridad, RT
- Escurrir sin enjuagar
- Post-tinción 1 a 2 minutos con citrato de plomo según Reynolds (Ref # 11300 de Delta Microscopies)
- Escurrir, enjuagar brevemente, secar y listo para ver.
*nota: la solución puede conservarse durante no más de una semana, pero más tiempo en una solución tampón de cacodilato, botella AirLess (sin crecimiento bacteriano).
