Vorbereitung und Verwendung des O.T.E.
Die Zubereitung der OTE-Lösung ist ähnlich wie der Aufguss von Teewasser 70°C oder Puffer 0,1M.(*)
– Lösen Sie Ihr OTE-Pulver mit einem auf 70°C eingestellten Heizmagnetrührer in einer Konzentration von 0,2% auf (da die Sättigung bei 0,3% erreicht wird)
– Nach vollständiger Auflösung (15 bis 30 Minuten unter Rühren bei 70 ° C),
- Filtern Sie Ihre OTE-Extraktlösung bei 0,45µ.
- In einem kleinen Eppendorf-Röhrchen, das maximal gefüllt ist, um sauerstoffhaltige Luft zu reduzieren, oder in einer AirLess-Flasche aufbewahren.
- Im Dunkeln bei 4 °C aufbewahren (bei der Handhabung die Lösungen immer auf RT zurückkehren lassen)
- Kontrastieren Sie Ihre Gitter mit OTE für 15 bis 25 Minuten, Dunkelheit, RT
- Einfach abtropfen lassen, nicht ausspülen
- Nachfärben 1 bis 2 Minuten mit Bleizitrat nach Reynolds (Ref. 11300 von Delta Microscopies)
- Abgießen, kurz abspülen, abtrocknen und fertig zum Anschauen.
*Anmerkung: Die Lösung kann nicht länger als eine Woche aufbewahrt werden, aber mehr Zeit in einer Kakodylat-Pufferlösung, AirLess-Flasche (kein Bakterienwachstum).