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Vorbereitung und Verwendung des O.T.E.

Die Zubereitung der OTE-Lösung ist ähnlich wie der Aufguss von Teewasser 70°C oder Puffer 0,1M.(*)

– Lösen Sie Ihr OTE-Pulver mit einem auf 70°C eingestellten Heizmagnetrührer in einer Konzentration von 0,2% auf (da die Sättigung bei 0,3% erreicht wird)

– Nach vollständiger Auflösung (15 bis 30 Minuten unter Rühren bei 70 ° C),

  1. Filtern Sie Ihre OTE-Extraktlösung bei 0,45µ.
  2. In einem kleinen Eppendorf-Röhrchen, das maximal gefüllt ist, um sauerstoffhaltige Luft zu reduzieren, oder in einer AirLess-Flasche aufbewahren.
  3. Im Dunkeln bei 4 °C aufbewahren (bei der Handhabung die Lösungen immer auf RT zurückkehren lassen)
  4. Kontrastieren Sie Ihre Gitter mit OTE für 15 bis 25 Minuten, Dunkelheit, RT
  5. Einfach abtropfen lassen, nicht ausspülen
  6. Nachfärben 1 bis 2 Minuten mit Bleizitrat nach Reynolds (Ref. 11300 von Delta Microscopies)
  7. Abgießen, kurz abspülen, abtrocknen und fertig zum Anschauen.

*Anmerkung: Die Lösung kann nicht länger als eine Woche aufbewahrt werden, aber mehr Zeit in einer Kakodylat-Pufferlösung, AirLess-Flasche (kein Bakterienwachstum).